Promotie: Highly sensitive capillary electrophoresis analysis coupled to ion mobility-mass spectrometry

Glycosylering is structureel de meest complexe posttranslationele modificatie van eiwitten en speelt een sleutelrol in veel biologische en ziekteprocessen. Om de biologie van glycanen en glycoconjugaten te begrijpen en biologicals te ontwikkelen, is het essentieel om exacte glycanstructuren te bepalen.

Dit werk beschrijft nieuwe elektroforetische analysemethodieken voor de scheiding en identificatie van glycanen, gebaseerd op hun mobiliteit in de vloeistof- en gasfase. Een overzicht van capillaire elektroforese (CE) voor de analyse van zowel glycanen als eiwitten wordt gegeven en een nieuwe CE-massaspectrometrische (MS) methode wordt gepresenteerd voor gevoelige glycananalyse. In deze methode is CE verbeterd voor gevoelige glycananalyse met behulp van kolommen om het monster te concentreren vanuit een groot injectievolume.

Daarnaast worden nieuwe ionenmobiliteitsspectrometrie (IMS)-MS-methodieken beschreven, ontwikkeld met behulp van glycaanstandaarden, voor nauwkeurige structurele toewijzing van glycanen. Deze methodieken maken een precieze opheldering van de glycaanstructuur mogelijk door het meten van de intrinsieke conformatieverdeling in de gasfase van intacte en fragmentionen met IMS-MS.

De ontwikkelingen die in dit werk worden beschreven, vormen een aanvulling op en versterken de huidige beschikbare analytische technieken. De methodieken bieden een hoge gevoeligheid en verbeterde precieze structuuropheldering van glycanen voor karakterisering in biologische monsters en biologische geneesmiddelen.